2018年3月25日

灰茶尺蛾核型多角体病毒的精细结构及生物学特性研究

灰茶尺蛾(Ec,rop‘5 grise,ceosw)鳞翅类的虫尺蛾科,这是最近几年中在湖北茶坊病虫害盛行,1988年陈棣华等田第一次在灰茶尺蛾幼体体内发明核型多面的病毒(略号EgNPv),现对该病毒的微细建筑物及多少生物特点停止了探索。 基面和·办法 (一)基面 内地饲养灰茶尺蛾幼体。敷用药zxlo,PIB/ml 无经验的茶叶3龄幼体的去细胞涂片,幼体传染侵袭亡故后,虫的剩余贮存在50多丙三醇中。,贮存在制冰机里。 (二)的精炼和升华蛋清和病毒粒子。 磨碎和过滤被传染剩余的剩余,经过颠倒差速离心过滤过滤,40后形成糖浓度梯度离心(w/w)60前文,300or/minz小时,以蛋清沉淀区,形成糖离心洗濯,承受纯洁的多面的。在4℃。 接合点蛋清升华。.,mol/LN礼Cq-0.16 oollL Nacl酒,10分钟,房间的体温降低价值,加人,蒸馏水和严大块,在6000r/min离心20分钟,去沉淀。上消液经14000:/min离心20分钟,降水是第一病毒粒子。 (三)电样。 1。多面的的升华,滴在铜片上formvor膜,用戊二醛常作复合词,裁定脱水,紧要关头平淡处置,金旋喷镀,由中科科仪amray ~ 100ob扫描电子显微镜注意。同时,滴挂在formvor多面的膜的铜网,在杰姆型100c相同电子显微镜注意。 2。用裁定的办法常作复合词的多面的、脱水、包埋、凑合,有2的使决定 1 28超薄部件。相同电子显微镜注意。 三.核蛋白质排放:升华的病毒颗粒挂液,用,双0。,mol/L脲,室温8至10小时,以30 L混合,加50到1 钱zmol/L乙酸,细胞着色剂C 10 EDTA和10四川10mg/ml,展出干液层,双蒸馏水为液相,单分子显示,敷用药表格四R碳膜的铜网把病毒核蛋白质,大夫后的铱筏流旋转规划,JEM一1 00c的注意。 (四)传染实验 菜蛾5 2 3龄幼体,有别于用EgNpV悬架(L 2 x 10,PIB/ml)涂食叶,亡故人数统计学。 (五)毒力使决定方 用确切的浓度的EgNPV病毒悬液有别于涂抹鲜叶,饲养2龄灰茶尺蛾幼体,裁定生物统计学法计算二和LT。 卒与议论(一)核型多面的病毒多面的的模型建筑物,两三个把切成小方块。具有粗糙外面的细菌,第一较大的差距的按大小名列前茅,从Philip M,大约M的分摊(图1 Lu Bu)。 床蛋清膜蛋清。,内含落落大方按用格子覆盖或装饰名列前茅的多面的蛋清【3】,病毒颗粒独自嵌入随机交替。当用稀碱酒中,蛋清潦倒,可以看出,落落大方的病毒粒子中象征的多卤。从此,虫棒状病毒(棒状病毒)子群,单包封。 病毒粒子和核 病毒颗粒呈杆状。,两端钝圆,分摊上涂料约为287×65rim。放大率后的病毒颗粒的海拔,在其两端是清晰可见的环状建筑物封顶。。据猜想,这能够是在传染时期的现场评议相干,与普通的病毒粒子相形,帽状建筑物尤其地硼。它可以注意到病毒颗粒四周是床楼中楼F。,有两个扁杆状病毒粒子。拆下盖膜 图l灰茶尺蛾病毒多面的模型建筑物图1.灰茶尺蛾病毒多面的(扫描电子显微镜x8000)2.碱解进行正中鹄的EgNPV(x16700)3.病蠢拉子顶端的环状建筑物(×60000):环状建筑物,乡间封锁和影片外壳的病毒颗粒的排放,b(x60000)的环状DNA分子(×39000;后的病毒粒子比病毒粒子软及粗弹性(图卜3),病毒粒子意义病毒的核蛋白质和衣壳蛋清。 (三)核蛋白质病。 核型多面的病毒染色体组为环状双链DNA封锁,DNA超螺旋结构设计一个版式在病毒粒子,一步法排放法,渗透压力规律的奄改变,从病毒颗粒目前的排放的DNA分子。因排放的度或时期,据注意,某一DNA分子四散的的病毒颗粒,b),完整从DNA的病毒颗粒排放电缆。、环状、三种过分的螺旋结构。这是鉴于田径运动进行正中鹄的身体反省功能。,它可以经过第一完整皱缩环DNA做,按大小计算核蛋白质式量,J。从图1,和egnpv DNA式量约34的测计算办法 x10’道尔顿,较普通虫棒状病毒DNA式量为小。这尚须从此以后与遗传因子身负重担的人中测出的式量共同的批准t’。 (四)寄主广大地域 2龄的茶尺嫂、家蚕、菜粉蝶、Litura和抽通尺对法国人的蔑称幼体,在EgNPV的传染,实验组和对照组的亡故率是批准的。实验组经显微镜反省缺席死虫多面的。同时,将茶尺蟆核型多面的病毒传染3龄灰茶尺蛾,实验组的亡故率高于对照组。从此,egnpv可以传染超越,种鳞翅类的虫虫。 (五)生物力程度使决定 2龄幼体其传染浓度与幼体亡故回归垂线方程为y一一,。~ x 10,当体温约25°PIB / MLO,传染浓度为78。 x 10.PIB/ml时,LT 2龄幼体,为,.,天。灰茶尺蛾核型多面的病毒的微细建筑物及生物特点探索@陈棣华$奇纳河科学认识院武汉病毒探索所!武汉

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李涛为奇纳河武汉病毒探索所!武汉

石正莉,奇纳河科学认识院武汉病毒探索所!武汉灰茶尺蛾核型多面的病毒;;模型建筑物;;生物特点在湖北省茶坊益虫灰茶尺蛾(Ectropis grisescens W)幼体拆移的核型多面的病毒,属棒状病毒科单包封。多面的无规律的多面的,m的分摊按大小名列前茅。该病毒粒子的分摊上涂料为287×65nm,第一环形盖在第一粒子的两端。测egnpv DNA式量约为34×10 ~ 6道尔顿。的ld_生物毒性实验(?)* 10 ~ 5pib/ml。1. 陈迪华等:茶叶科学认识,9(1) :91-92,1989。

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